Wir sequenzieren Ihre gereinigten, auf PVDF Membrane übertragenen Proteinproben durch Edman-Abbau. Wir sequenzieren standardmäßig 5 N-terminale AS-Reste, bei ausreichender Proteinkonzentration sind 20 zusätzliche N-terminale AS-Reste möglich. Bitte stellen Sie uns ca. 15-20 pmol Protein zur Verfügung. Wenn Sie mehr Probenmaterial zur Verfügung stellen können, so ist dies von Vorteil.
Probenvorbereitung
- Isolieren und reinigen Sie ihre Proteinprobe sorgfältig. Achten Sie insbesondere darauf, dass tatsächlich nur eine Proteinart isoliert wurde.
- Übertragen Sie das Protein auf eine chemisch inerte PVDF- oder Glasfasermembran. Die zu analysierenden Proteinbanden müssen eindeutig und klar auf der Membran markiert sein. Coomassie Blue (R250) oder Ponceau Rot gefärbte / entfärbte , deutlich sichtbare Banden , optimal in Triplikat und parallel zu einem MG-Marker, sind von Vorteil.
- Falls Sie lyophilisierte oder in Lösung (z.B. Wasser, Acetonitril, Propanol) vorliegende Proteinproben sequenzieren lassen wollen, so achten Sie bitte darauf, dass diese keine störenden Puffersubstanzen wie z.B. Tris, Detergentien und/oder Proteine (z.B. BSA) enthalten dürfen.
- Benutzen Sie für Ihre Angaben zur Probe unser Auftragsformular, senden Sie die Proben an unser Labor — am besten in einem stabilen Umschlag verpackt.
Wichtige Hinweise
- Aminogruppentragende Puffersubstanzen (z.B. Tris), Detergentien (z.B. SDS) und Fremdproteine (z.B. BSA) dürfen nicht anwesend sein.
- Spülen Sie die Membran nach der Entfärbung gründlich mit destilliertem Wasser.
- Verwenden Sie keine Gefäße, Puffer oder (Färbe-) Lösungen die zuvor mit Milchpulver oder anderen zum Blockieren von Membranen verwendete Substanzen in Kontakt gekommen sind.
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